Kouman jele-sèk yon Kilti bakteri (Lyophilization)

Lyophilization, oswa seche friz, se yon pwosedi laboratwa kout

Glase-seche, ki rele tou lyophilization ou cryodesiccation, se pwosesis pou retire dlo ki sòti nan yon pwodwi apre li nan frizè (ak Lè sa a, mete anba yon vakyòm) ki pèmèt glas chanje soti nan yon solid nan yon vapè, san yo pa ale atravè tout yon faz likid. Glas (oswa lòt solvang frizè) yo retire nan yon pwodwi nan pwosesis sublimasyon ak molekil dlo mare yo retire nan pwosesis la nan desorption.

Basics yo nan Lyophilization

Youn nan pi bon fason yo nan magazen yon bakteri, chanpiyon, ledven oswa lòt kilti mikwo-òganis pou peryòd tan ki long se yo sèvi ak pwosesis la nan friz-seche. Ka pwosedi kout laboratwa sa a ap antreprann ak nenpòt ki frizè ki disponib frizè-secheur ki pral prezève koleksyon kilti ou. Paske lyophilization se fòm ki pi konplèks ak chè nan seche, se pwosesis la anjeneral restriksyon nan delika, materyèl chalè-sansib nan valè segondè. Sibstans ki pa domaje pa lè w konjele ka anjeneral yo ka lyophilize pou depo ki nan frijidè a pa nesesè.

Pwosesis sa a ka pran tankou ti twa èdtan, epi osi lontan ke 24 èdtan, ki pa enkli tan kwasans kilti.

Etap-pa-etap Pwosesis la nan Lyophilization

1. Premyèman, grandi yon kilti lannwit lan, oswa gazon, nan mikwo-òganis la sou LB oswa lòt plak apwopriye eleman nitritif plak.

2. Apre sa, prepare esteril fatra-bouchon flè pa autoclaving devan yo nan tan, ak bouchon yo (kawotchou stoppers) mete blesi sou tèt. Mete etikèt papye yo enprime ak idantifikasyon kilti a andedan tib yo anvan yo otoklavaj. Altènativman, itilize tib ak bouchon ki fèt pou esterilite .

1. Add 4 mL tanpon lyophilization plak la. Si sa nesesè, selil yo ka sispann lè l sèvi avèk yon baton vè esteril.

2. Byen vit transfere sispansyon kilti a nan flak esterilize yo. Add apeprè 1.5 mL pou chak flakon. Bouche ak bouchon an kawotchou.

3. Glase sispansyon kilti a anndan flakon yo pa mete flacons yo nan yon -20 degre Celcius frizè.

1. Yon fwa ke kilti yo nan frizè, prepare friz seche rad la pa vire l 'sou ak pèmèt tan pou tanperati ki apwopriye a ak kondisyon vakyòm yo estabilize. Èske sa a dapre enstriksyon fabrikan an pou mak an patikilye nan friz seche rad w ap itilize.

2. Ak anpil atansyon, ak aseptik, mete bouchon yo flakan blesi sou tèt nan flakon yo, pou ke imidite ka chape pandan pwosesis la friz-seche, epi mete flacons yo nan yon chanm friz-seche. Aplike vakyòm nan chanm lan selon enstriksyon fabrikan an.

3. Pèmèt tan nan kilti konplètman lyophilize (sèk deyò). Sa a ka pran nan kèk èdtan nan lannwit lan depann sou volim nan chak echantiyon ak konbyen echantiyon ou genyen.

4. Retire tout echantiyon yo nan chanm frizè a daprè enstriksyon fabrikan an epi imedyatman sele vial yo avèk bouchon an kawotchou, akote tèt yo.

5. Sere koleksyon kilti lyophilize nan tanperati chanm nan.

Pwodwi Ou ap bezwen

• Glase-seche rad
• Eleman nitritif oswa lòt plak Agar ki apwopriye (ak enkibatè yo grandi kilti)
• Glass baton
• Lyophilization pezib
• Crimp-tèt flakon ak stope kawotchou (ak yon crimper pou aplike bouchon yo)
• Frizè

<sub>Referans:

SP syantifik. Prensip Debaz nan Siye jele. http://www.spscientific.com/freeze-drying-lyophilization-basics/</sub>