Kòman pou fè sa a tanpon pou pwoteje imunohistochemik
Phosphate saline puffer (PBS) se yon solisyon pezib ki souvan itilize pou immunohistochemical (IHC) tach e li souvan itilize nan rechèch byolojik. PBS se yon solisyon sèl ki baze sou dlo ki gen fosfat Idwojèn sodyòm, klori sodyòm ak, nan kèk ka, klori potasyòm ak fosfat idrogen potasyòm.
Immunohistochemical tach
Immunohistochemistry refere a pwosesis la nan detekte antijèn tankou pwoteyin nan selil yo nan yon seksyon tisi lè l sèvi avèk prensip la nan antikò obligatwa espesyalman nan antijèn nan tisi byolojik.
Tib Immunofluorescent te premye metòd la tach immunohistochemical.
Antijèn vin vizib lè konjige ak antikò lè l sèvi avèk kolore fliyoresans akòz yon reyaksyon obligatwa antijèn antikwiv Pwosesis sa a rive lè li aktive pa limyè enteresan nan yon longèdonn espesifik anba yon mikwoskòp fluoresan.
Osmolarite a ak konsantrasyon ion nan solisyon yo matche ak sa yo ki nan kò imen an - they're izotonik.
Yon resèt pou PBS
Ou ka prepare PBS nan plizyè fason. Gen fòmil miltip. Kèk nan yo pa gen potasyòm, pandan ke lòt moun gen kalsyòm oswa mayezyòm .
Sa a resèt se relativman fasil. Li nan pou 10X PBS solisyon stock (0.1M). Sepandan, ou ka tou fè yon solisyon stock 1X, oswa kòmanse ak sa a 10X resèt ak delye li nan 1X.
Pwosè an antye pran apeprè 10 minit.
Yon opsyon pou ajoute Tween tou bay.
Ki sa ou ap bezwen fè PBS tanpon
- Sodyòm fosfat monobaz (anidrid)
- Sodyòm fosfat dibasik (anidrit)
- Klori Sodyòm
- Echèl ak bato peze
- Mayetik stirrer ak brase bar
- Yon pH probe ki kalibre ak apwopriye solisyon pou ajiste pH
- 1L volumetrik flakon
- Ant 20 (opsyonèl)
Ki jan yo fè Phosphate buffered Saline (PBS)
Peze 10.9g anidrit sodyòm fosfat dibasik (Na2HPO4), 3.2g anidrit sodyòm fosfat monobasik (NaH2PO4), ak 90g klori sodyòm (NaCl).
Fonn nan jis anba 1L dlo distile.
Ajiste pH a nan 7.4, epi fè solisyon an jiska yon volim final nan 1L.
Anpeche 10x anvan yo itilize ak rejust pH a si sa nesesè.
Ou ka fè yon solisyon PBS ki genyen 0.5 pousan ant 20 pa ajoute 5mL ant 20 a solisyon 1L.
Konsèy pou fè PBS tanpon
Sere tanpon an nan tanperati chanm apre ou te fè solisyon an PBS.
Reyaktif ki pa anidr ka ranplase men ou pral oblije rkalkulra mas ki apwopriye pou chak akomode molekil dlo yo ajoute yo.
Itilizasyon Phosphate buffered Saline (PBS)
Fosfat saline pufferin gen anpil itilizasyon paske li se izotonik ak ki pa toksik nan pifò selil yo. Li ka itilize yo delye sibstans ki sou ak li souvan itilize rense kontenè nan selil yo. PBS ka itilize kòm yon dilutan nan divès metòd pou sèk biomolekil paske molekil dlo yo ki nan l 'yo pral estriktire alantou sibstans-pwoteyin a, pou egzanp. Li pral "cheche" ak imobilize nan yon sifas ki solid.
PH la rete fiks epi ki konsistan pou anpeche destriksyon selil yo.
Fim nan mens nan dlo ki mare sibstans la anpeche denaturation oswa lòt chanjman konfòmèl. Karbonate tanpon ka itilize pou menm objektif men avèk mwens efikasite.
PBS ka itilize tou pou pran yon spectre referans lè mezire absorption pwoteyin nan elipsometri.