Sa a tanpon yo itilize pou etidye mouvman ADN
Sa a tanpon gen yon fòs ki ba iyonik ak kapasite tampon ki ba. Li pi bon pou elektwoforèz nan gwo (> 20 kb) moso nan ADN epi yo pral bezwen ranplase souvan oswa rezolisyon pou pi lontan (> 4 h) fwa jèl kouri.
Avèk sa nan tèt ou, ou ka vle konsidere plizyè lo nan zòn de defans la.
Etandone ke tanpon la fasil pou fè ak etap yo ka te pote soti byen vit, fè plis pase yon sèl pakèt nan yon tan pa ta dwe patikilyèman tan konsome oswa difisil rale. Sèvi ak enstriksyon ki anba yo, li ta dwe pran jis 30 minit pou fè tanpon TAE a. Men ki jan:
Prepare yon Solisyon Stock nan EDTA
Yon EDTA (ethylendiamine asid tetraosetik) solisyon prepare anvan de tan. EDTA pa pral ale konplètman nan yon solisyon jiskaske pH la ajiste apeprè 8.0. Pou yon solisyon stock 500 mililit nan 0.5 M EDTA, peze soti 93,05 gram nan sèl dinasti EDTA (FW = 372.2). Fonn nan 400 mililitèr dlo deionised ak ajiste pH la ak idroksid sodyòm (NaOH). Top moute solisyon an nan yon volim final nan 500 mililit.
Fwe moute yon solisyon Stock nan TAE
Fè yon konsantre (50x) solisyon stock nan TAE pa peze soti 242 gram baz Tris (FW = 121,14) ak dissolve li nan apeprè 750 mililit nan dlo deionised.
Ak anpil atansyon ajoute 57.1 mililit nan asid glacial ak 100 mililit nan 0.5 M EDTA (pH 8.0). Apre sa, ajiste solisyon an nan yon volim final nan 1 lit. Ka solisyon sa a stock dwe estoke nan tanperati chanm. PH nan zòn de defans sa a pa ajiste e yo ta dwe apeprè 8.5.
Prepare yon solisyon travay nan TAE
Solisyon a k ap travay nan pezeur 1x TAE se te fè pa tou senpleman dilution solisyon an stock pa 50x nan dlo deionised.
Final konsantrasyon solitab yo se 40 mM. Tris-asetat ak 1 mM EDTA. Tanpon la se kounye a pare pou itilize nan kouri yon jèl agaroz.
Ki sa ou bezwen pou tanpon la
Depi fè tanpon TAE a sèlman mande pou yon seri rapid ak senp nan enstriksyon, kantite materyèl ki nesesè pou li pa twòp. Ou pral jis bezwen EDTA dinamit sèl, Tris baz, ak asid Acetic glacial.
Fè pezib la mande tou yon metòd pH ak estanda kalibrasyon, jan sa apwopriye. Ou pral bezwen tou 600 milliliter ak 1500 milliliters Beakers oswa bwat kòm byen ke silenn gradye. Finalman, ou pral bezwen deionized dlo, ba blese, ak plak brase.
Wrap moute
Ki kote ou planifye pou fè tanpon lan - nan yon sit lekòl, yon sit travay, oswa yon lòt kote, tankou kay ou a? Tcheke envantè a anvan ou kòmanse asire ou gen tout materyèl ki anwo yo pou tanpon TAE a.
Si ou ta pito pa gen pou peye pou materyèl, chwazi yo fè pezib la deyò nan kay ou rekòmande. Ou ka fasilman mande materyèl ou bezwen sou entènèt oswa vizite yon magazen espesyalite pou yo.