Mezire Kinetics anzim
Kòm yon ti jan nan background, anzim yo se pwoteyin ki aji kòm katalis nan diminye kantite lajan an nan enèji aktivasyon pou yon reyaksyon rive. Aktivasyon enèji se enèji ki oblije jwenn reyaksyon "te kòmanse" depi anpil reyaksyon pa rive trè vit (oswa rive nan tout) si yo thermodynamically posib.
Anzymes catalyze reyaksyon espesifik nan yon sit patikilye (ke yo rekonèt kòm sit aktif) kote réactivants yo mare ak reyaji pou jenere pwodwi yo. Substrats gen sit aktif ki espesifik sèlman nan yo pou ke pa gen okenn sibstans ki sou lòt mare oswa reyaji nan sit la menm. Tankou yon seri kle ak kle, chak anzim ap katalize sèlman yon reyaksyon espesifik (ak kèk eksepsyon).
Aktivite espesifik yo itilize nan metòd izolasyon pwoteyin pou endike pousantaj nan pirifikasyon. Li enpòtan pou w konnen inite sa a lè ou achte enzym yo pou endike egzakteman konbyen nan anzim pi bon ou ap resevwa.
Lè mezire kinzymi anzim (pousantaj reyaksyon yon anzim ki gen yon substra - oswa sifas), espesifik aktivite yo defini kòm kantite substra anzim la konvèti (reyaksyon katalize), pou chak mg pwoteyin nan preparasyon an anzim, pou chak inite tan.
Yon egzanp aktivite espesifik ta dwe:
- Aktivite espesifik nan anzim la izole yo te mezire nan 150 rim / min / mg pwoteyin anvan pirifye ak 800 rim / min / mg, apre yo fin pirifye.
Aktivite espesifik se yon mezi enpòtan nan posyom anzim. Diferan lo nan yon anzim pi bon kalite yo ta dwe gen menm valè ak menm dilution yon solisyon anzim anpil fwa yo pral gen idantik valè aktivite espesifik menm si pral gen diferan valè aktivite anzim. Sa a se paske nan kalkil aktivite espesifik, nimeratè a (inite / ml) ak denominatè (mg / ml) ki afekte egalman.
Aktivite espesifik trè diferan de aktivite, men kalkil aktivite espesifik la toujou depann sou valè aktivite a. Sa vle di ke deklarasyon espesifik aktivite a ap depann tou sou definisyon an inite nan anzim la.
Pak nan anzim ki gen pi ba pase espere valè aktivite espesifik ka gen ladan molekil anzim ki te vin chanje oswa melanje ak enpurte.
Faktè ki afekte aktivite anzim
Li posib ke yon sèl anzim ka gen diferan valè aktivite mezire lè yo mezire nan laboratwa diferan (sa vle di, diferans reyèl nan aktivite ki mezire, pa diferans aparan ki te koze pa itilizasyon diferan definisyon inite).
Fason an se yon echèk te pote soti (metòd la nan tès detèmine pite a nan anzim) ap enfliyanse valè yo rapòte rapòte. Pou egzanp, anzim yo jeneralman pi aktif ant tanperati 37 degre Sèlsiyis konpare ak a 20 degre Sèlsiyis, kidonk si se yon echantiyon te pote soti nan 21 degre Sèlsiyis, valè yo ap diferan de tès yo fèt nan yon tanperati 32 degre Sèlsiyis (tipikman , estimasyon yo te pote soti nan yon tanperati ant 20-37 degre Sèlsiyis).
Se konsa, definisyon an nan inite a anzim ta pi bon eksprime kòm 1 inite (U) se kantite lajan an nan anzim ki catalyze reyaksyon an nan 1 nmol nan substra pou chak minit anba kondisyon estanda.