Ki sa ki reyaksyon chimik polymererase (PCR)?

PCR kanpe pou reyaksyon chimik polymère a , yon teknik byoloji molekilè pou anplifikasyon segman ADN, pa génie kopi miltip lè l sèvi avèk anzim polymeras ADN anba kondisyon kontwole. Kòm ti kòm yon kopi yon sèl nan yon segman oswa jèn yo ka klone nan dè milyon de kopi, sa ki pèmèt deteksyon lè l sèvi avèk koloran ak teknik vizyalizasyon lòt.

Devlope nan 1983, pwosesis la nan PCR te fè li posib fè sekans ADN ak idantifye lòd la nan nukleotid nan jèn endividyèl elèv yo.

Metòd la itilize monte bisiklèt tèmik oswa chofaj la repete ak refwadisman nan reyaksyon an pou fonn ADN ak replikasyon. Kòm PCR ap kontinye, se "nouvo" ADN la itilize kòm yon modèl pou replikasyon ak yon reyaksyon chèn ki rive, exponentially anplifye modèl ADN la.

Teknik PCR yo aplike nan plizyè domèn biotechnologie tankou jeni pwoteyin , klonaj, forensics (ADN), tès patènite, dyagnostik maladi éréditèr ak / oswa enfektye, ak analiz echantiyon anviwonman an.

Nan forensics, an patikilye, PCR se itil espesyalman paske li anplifye menm kantite lajan ki pi piti nan prèv ADN. PCR ka itilize tou pou analize ADN ki gen dè milye ane, epi teknik sa yo te itilize pou idantifye tout bagay soti nan yon mamout 800,000-zan pou momi soti nan atravè mond lan.

Pwosedi PCR se jan sa a:

• Inisyalizasyon: Etap sa a nesesè sèlman pou polymère ADN ki mande PCR cho-kòmanse. Se reyaksyon an chofe ant 94 ak 96 ° C ak ki te fèt pou 1-9 minit.

• Denaturation: Si pwosedi a pa mande pou inisyalizasyon, denaturation se premye etap la. Se reyaksyon an chofe 94-98 ° C pou 20-30 segonn. Lye idwojèn modèl ADN yo ap deranje epi molekil ADN sèl-bloke yo kreye.
• Ankadreman: Tanperati reyaksyon an pi ba ant 50 ak 65 ° C ak ki te fèt pou 20-40 segonn. Prensip yo anneal modèl ADN sèl-bloke. Tanperati a trè enpòtan pandan etap sa a. Si li twò cho, jadendanfan a pa ka mare. Si li twò frèt, jadendanfan an ta ka mare enpafè. Yon kosyon bon fòme lè sekans lan primè a matche ak sekans modèl la.

• Ekstansyon / Elongasyon: Tanperati a pandan etap sa a varye selon kalite polymeramer. Polymerase ADN a fè yon stran ADN konplètman nouvo.
• Final elongasyon: Se etap sa a fèt nan 70-74 ° C pou 5-15 minit apre sik PCR final la.
• Final kenbe: etap sa a se si ou vle. Tanperati a kenbe nan 4-15 ° C ak strops reyaksyon an.

Pwosedi a divize an twa etap:

• Eksponansyèl anplifikasyon: Pandan chak sik, pwodui (moso espesifik ADN ki repwodwi) double.
• Etap-nan etap: Kòm polymerase ADN la pèdi aktivite ak konsome reyaktif, reyaksyon an ralanti.
• Plak: Pa gen plis pwodwi akimile.